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Hifair? V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉錄酶 11300ES92
Hifair? V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉錄酶 11300ES92
  • Hifair? V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉錄酶 11300ES92

Hifair? V Reverse Transcriptase 第五代耐熱逆轉錄酶 11300ES92

產品報價:1623元

更新時間:2020/2/24 22:02:06

地:上海

牌:翊圣生物

號:11300ES92

廠商性質: 生產型,貿易型,服務型,

公司名稱: 上海翊圣生物科技有限公司

產品關鍵詞: 一步法RT-qPCR   逆轉錄酶   熒光定量   基因克隆  

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翊圣生物 : (13916792673) (400-6111-883)

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Hifair? V Reverse Transcriptase 代耐熱逆轉錄酶

產品信息

產品名稱

產品編號

規格

價格(元)

Hifair? V Reverse Transcriptase 代耐熱逆轉錄酶

11300ES92

10000 U

1623.00

Hifair? V Reverse Transcriptase 代耐熱逆轉錄酶

11300ES93

50000 U

5623.00

產品描述

Hifair? V Reverse TranscriptaseHieff? M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基礎上通過基因工程技術得到的全新逆轉錄酶,與Hieff? M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,其熱穩定性大幅度提高,可耐受高達60℃的反應溫度,適合具有復雜二級結構的RNA模板的逆轉錄。同時,該酶增強了與模板的親和力,適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉錄。Hifair? V Reverse Transcriptase合成全長cDNA的能力也有了提升,可擴增長達10 kbcDNA。

產品組分

編號

組分

產品編號/規格

11300ES92 (10000 U)

11300ES93 (50000 U)

11300-A

Hifair? V Reverse Transcriptase (200 μM)

50 μL

250 μL

11300-B

5×Hifair? V Buffer

250 μL

1.25 mL

產品應用

一步法RT-qPCR;基因克隆;熒光定量。

活性定義

Poly(A) .Oligo(dT)為模板-引物,在37℃,10 min內,將1 nmoldTTP摻入為酸不溶性物質所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。

質量控制

核酸外切酶殘留檢測:200 U本酶和1 μg λDNA-Hind Ⅲ,37℃下孵育1 h,DNA的電泳譜帶不發生變化。

核酸內切酶殘留檢測:200 U本酶和1 μg Supercoiled pBR322 DNA,37℃下孵育1 h,DNA的電泳譜帶不發生變化。

RNase殘留檢測:200 U酶和1 μg小鼠肝臟總RNA,37℃下孵育1 h,RNA電泳譜帶不發生變化。

運輸與保存方法

冰袋運輸。-20℃保存,有效期2年。

注意事項

1)請保持實驗區域潔凈;操作時需穿戴干凈的手套、口罩;實驗所用耗材均需保證RNase free,以防止RNase污染;

2)所有操作均應在冰上進行,防止RNA降解;

3)為保證高效率逆轉錄,建議使用高質量的RNA樣本;

4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。


第一鏈cDNA合成操作步驟

1. RNA變性(此步為可選步驟,RNA變性有助于打開二級結構,可在很大程度上提高第一鏈cDNA的產量。)

組分

使用量

RNase free ddH2O

to 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

or Random Primers (50 μM)  

or Gene Specific Primers (2 μM)

1 μL

or 1 μL

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 1 ng -5 μgmRNA:1 ng-500 ng

65℃加熱5 min,迅速置于冰上冷卻2 min。簡短離心收集反應液后,加入下表中的逆轉錄反應液,并輕輕吹打混勻。

2. 逆轉錄反應體系配制(20 μL體系)

組分

使用量

上一步的反應液

13 μL

5×Hifair? V Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair? V Reverse Transcriptase (200 U/μL)

1 μL

RNase inhibitor (40 U/μL)

1 μL

3. 逆轉錄程序設置

溫度

時間

25℃

5 min

42℃

15-30 min

85℃

5 min

【注】:1)當使用Random Primers時,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18Gene Specific Primers,此步可省略。

2)逆轉錄溫度:推薦使用42。對于GC含量模板或者復雜二級結構的模板,可將逆轉錄溫度提高至50-55。

385℃加熱5 min,目的是使逆轉錄酶失活。

逆轉錄產物可立即用于后續PCRqPCR反應,也可-20℃短期保存,若需長期保存,建議分裝后,于-80℃保存,避免反復凍融。

相關產品

產品名稱

貨號

規格

(元)

Murine RNase Inhibitor(40 U/μL) 鼠源RNase抑制劑

10603ES05/10

2/10KU

216/916

Hieff? HotStart Taq DNA Polymerase(配體法熱啟動DNA聚合酶)

10110ES72/80

250/1000U

186/636

Hieff UNICON? HotStart Taq DNA Polymerase(抗體法熱啟動Taq酶)

10113ES60/76

100/500U

216/656

Hieff Unicon? qPCR TaqMan Probe Master Mix

11205ES08

5 mL

740

Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix

11208ES08

5 mL

5565

Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 熱敏UDG

10303ES60/76

100/500 U

683/3083

dUTP, 100mM Solution 脫氧尿苷三磷酸溶液(100 mM

10128ES72/80

0.25/1 mL

253/853

dNTP Mix (25 mM each)

10125ES72/80

0.25/1 mL

116/353

HB200221


上海翊圣生物科技有限公司

| 第13

手機:13916792673

聯系人:翊圣生物

電話:400-6111-883

傳真:021-34615995

QQ:4006111883

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